Kit de purification de l'ARN total maxi
Pour la purification rapide de l'ARN total - y compris le microARN - sans utilisation de phénol
Kit de purification de l'ARN total maxi
Pour la purification rapide de l'ARN total - y compris le microARN - sans utilisation de phénol
Aperçu du produit
Le kit Maxi de purification de l'ARN total de Norgen fournit une méthode rapide pour l'isolement et la purification de l'ARN total à partir de cellules animales cultivées, d'échantillons de tissus, de sang, de bactéries, de levures, de champignons, de plantes et de virus. Le kit purifie toutes les tailles d'ARN, du grand ARNm et de l'ARN ribosomal jusqu'au microARN (miARN) et au petit ARN interférent (siARN). L'ARN est préférentiellement purifié des autres composants cellulaires tels que les protéines, sans utilisation de phénol ou de chloroforme. L'ARN purifié est de la plus haute intégrité et peut être utilisé dans un certain nombre d'applications en aval, notamment la PCR en temps réel, la PCR par transcription inverse, le transfert de Northern, la protection par la RNase et l'extension des amorces, ainsi que les essais de réseaux d'expression.
Technologie de purification de Norgen
La purification est basée sur la chromatographie sur colonne de spin utilisant la résine propriétaire de Norgen comme matrice de séparation. L'ARN est préférentiellement purifié des autres composants cellulaires tels que les protéines sans utilisation de phénol ou de chloroforme. Le processus consiste d'abord à lyser les cellules ou le tissu d'intérêt avec le Buffer RL fourni (voir le diagramme de flux à la page 4). L'ADN est ensuite capturé sur une colonne d'élimination de l'ADN génomique. De l'éthanol est ensuite ajouté au flux de l'étape d'élimination de l'ADN et la solution est chargée sur une micro-colonne de purification de l'ARN. La résine de Norgen lie l'ARN d'une manière qui dépend des concentrations ioniques. Ainsi, seul l'ARN se lie à la colonne, tandis que les protéines contaminantes sont éliminées dans le flux ou retenues sur la partie supérieure de la résine. L'ARN lié est ensuite lavé avec la solution de lavage A fournie afin d'éliminer toutes les impuretés restantes, et l'ARN total purifié est élué avec la solution d'élution A. La conception spéciale de la micro-colonne d'essorage permet un petit volume d'élution de seulement 20 μL. L'ARN purifié est de la plus haute intégrité et peut être utilisé dans un certain nombre d'applications en aval.
Détails
Données justificatives
Kit Specifications
|
|
Maximum Column Binding Capacity
|
1.5 mg
|
Maximum Column Loading Volume
|
20 mL
|
Size of RNA Purified |
All sizes, including small RNA
(< 200 nt) |
Maximum Amount of Starting Material
|
|
Liver Tissue
|
100 mg
|
Heart Tissue
|
50 mg
|
Kidney Tissue
|
100 mg
|
Brain Tissue
|
250 mg
|
Lung Tissue |
100 mg
|
Whole Blood
|
2 – 10 mL*
|
Bacteria | 2.5 x 10 10 cells |
Yeast |
2 x 108 cells
|
Fungi |
1 g
|
Plant Tissues |
1 g
|
Time to Complete 4 Purifications |
40 minutes
|
Average Yield:
HeLa Cells (5 x 107 cells) E. coli (2.5 x 1010 cells) |
~750 μg
~1.5 mg |
*For isolating total RNA from purified leukocytes
Storage Conditions and Product Stability
All solutions should be kept tightly sealed and stored at room temperature. This kit is stable for 2 years after the date of shipment.